食毛劑為纖維素酶，用于改善布面光澤度，提高布面的光亮風(fēng)格，那么食毛劑的能夠去除多少布面絨毛呢，這個(gè)就要分辨出食毛劑的活力，那么活力是怎么測(cè)定呢，本文簡(jiǎn)單簡(jiǎn)述測(cè)定方法：

１．濾紙崩潰法

1> 原理

    纖維素酶能分解濾紙，產(chǎn)生葡萄糖等還原糖，與3，5-二硝基水楊酸顯色劑作用，可生成橙黃色絡(luò)合物，用比色法能夠定量測(cè)定還原糖的生成量。本方法在最適條件下，以單位時(shí)間內(nèi)一定量的酶制劑釋放出的葡萄糖量，來(lái)表示纖維素酶制劑的活力。

2> 試劑

2.1>  3，5-二硝基水楊酸顯色劑

稱取10g 3，5-二硝基水楊酸（熔點(diǎn)168-169℃，若熔點(diǎn)偏低，則應(yīng)重結(jié)晶，方法是稱取10g 3，5-二硝基水楊酸，加50mL水，加熱溶解，冷卻析出結(jié)晶，過(guò)濾，用冷水洗滌，干燥后得白色結(jié)晶），溶于蒸餾水中，加入20 g氫氧化鈉，200 g酒石酸鉀鈉，加水500 mL，加熱溶解后，加入重蒸酚2g、無(wú)水亞硫酸鈉0.5 g，加熱攪拌，待全部溶解后，冷卻，移到1000 mL容量瓶中，稀到刻度，放置一周后過(guò)濾備用。此顯色劑應(yīng)貯存于棕色瓶中。

2.2>  緩沖溶液

0.04M，pH值為4.5的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液。

3> 方法

3.1> 酶液制備

按工藝要求的濃度、pH值等配制酶處理液。

3.2> 酶解

分別吸取酶處理液0、0.5、1.0、1.5、2.0mL，置于試管中，用pH值為4.5 的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液補(bǔ)足到2.0 mL。置于40℃水浴中保溫?cái)?shù)分鐘后，在每管酶液中加入1×25px²的新華1號(hào)層析濾紙6片，立即記時(shí)，準(zhǔn)確反應(yīng)60min，然后立即在沸水浴中加熱10min，使酶失活。

3.3> 顯色

    在上述每管酶解液中，加入3 mL 3，5-二硝基水楊酸顯色劑，在沸水中加熱15 min，冷卻，加蒸餾水10 mL，搖勻，用分光光度計(jì)在550 nm波長(zhǎng)下，用1 cm比色皿，以空白為對(duì)照，測(cè)定其光密度。以光密度為縱坐標(biāo)，各管酶濃度為橫坐標(biāo)作圖，應(yīng)成一通過(guò)原點(diǎn)的直線。取直線上任意一點(diǎn)計(jì)算即可。如成曲線關(guān)系（直線彎曲），應(yīng)將酶液進(jìn)一步稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。

3.4> 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

    準(zhǔn)確配制1000μg/ mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取0、0.10、0.20、0.30┄┄0.70 mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蒸餾水補(bǔ)足到2.0 mL，加3 mL  3，5-二硝基水楊酸顯色劑，同上進(jìn)行顯色、比色，以光密度（O.D.550nm）為縱坐標(biāo)，葡萄糖微克數(shù)為橫坐標(biāo)作圖，應(yīng)得一直線。

3.5> 計(jì)算

    在上述酶濃度和光密度對(duì)應(yīng)的直線上取酶量W，對(duì)應(yīng)O.D.550nm在葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得葡萄糖的微克數(shù)A，按下列公式進(jìn)行計(jì)算：

A

纖維素酶活力（單位/g）= ────-

t×W

式中：A —由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出釋放葡萄糖的量，μg；

      t —酶解所用的時(shí)間，min；

      W —反應(yīng)中含酶量，g（若原酶制劑為液體，則以mL計(jì)，同時(shí)酶活力單位以單位/ mL計(jì)）。

單位定義：在上述條件下（pH值為4.5，溫度為40℃），每分鐘分解濾紙產(chǎn)生1μg葡萄糖的酶量，為1單位的酶。